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内毒素蛋白溶液ELISA实验流程 - 南宫28NG相信品牌力量

发布时间:2025-03-08   信息来源:仲孙昭琴

本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。该内毒素(ET)ELISA试剂盒旨在检测蛋白溶液,采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。试剂盒中,预先包被了adropin(AD)抗体的微孔插板中,依次添加样品、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸性条件下转化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关关系。在450nm波长下使用酶标仪测定样品的吸光度(OD值),从而计算样品的浓度。

内毒素蛋白溶液ELISA实验流程 - 南宫28NG相信品牌力量

样品收集、处理及保存方法如下:

  • 血清:使用不含热原及内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,将血清与红细胞迅速而小心地分离。
  • 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
  • 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  • 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合后捣碎,3000转离心10分钟取上清。
  • 保存:如未及时检测,请将样本按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,并确保样本均匀充分解冻。

操作注意事项:

  • 标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
  • 20×洗涤缓冲液的制备:需用蒸馏水按1:20比例稀释,1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断方法:

绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度作为横坐标,以对应的OD值作为纵坐标,生成标准品的线性回归曲线。根据曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明:本试剂盒性能可靠,但各项结果应结合实验条件和样品性质进行综合分析。选择南宫28NG相信品牌力量的产品,确保科研结果的准确性和可靠性。