细胞系与细胞株的概念解析

南宫28NG相信品牌力量，在生物医疗领域对细胞系和细胞株的理解至关重要。

简述南宫28NG细胞系的建立与品牌力量

一、细胞系与细胞株的定义

细胞系（Cell Line）是首次成功传代的原代培养物，其由原代培养中的细胞世系（Lineage of Cells）构成。而细胞株（Cell Strain）则是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的特殊性质或标志物的细胞群体。这些标志需要在整个培养过程中持续存在。

根据传代能力的不同，细胞株可以分为有限细胞株（finite cell strain）和连续细胞株（continuous cell strain）。对于人类肿瘤细胞，若在体外培养超过半年并持续稳定生长，便可被称为连续性株或系。

对于细胞系的建立，特定的体外培养标准并无统一规定。主要依赖于具体情况。对于原代培养的细胞，只需保证供体的均一性、取材部位及组织种类的稳定。如果是长期培养，尤其是重复传代的细胞，必须提供以下信息：

1. 组织来源：需注明细胞供体所属物种（人类或动物）、性别、年龄及取材的器官或组织。如果是肿瘤组织，应提供临床及病理诊断，连同病历号等信息。

2. 细胞生物学检测：了解细胞的基本及特殊生物学特性，包括细胞形态、特异结构、细胞生长曲线、分裂指数、倍增时间及接种率等。特别是肿瘤细胞，需进行软琼脂培养、异体接种致瘤及对正常组织的侵润实验以证明其恶性特性。

3. 培养条件和方法：需详细说明细胞系（或株）的生存环境，包括使用的培养基、血清种类、用量和适宜的pH值。

1. 取材：肿瘤细胞主要来源于外科手术或活检，取材时应避免坏死组织，挑选活力良好的肿瘤部位。若取材后无法立即培养，可进行冻存，方法依正常组织相同。

2. 成纤维细胞的排除：肿瘤组织中常有成纤维细胞混杂，这些细胞可能抑制肿瘤细胞的生长，因此需仔细排除。常见排除方法包括机械刮除法、反复贴壁法、消化排除法及胶原酶消化法。

3. 提高肿瘤细胞的存活率与生长率：肿瘤细胞在体外培养时较为困难，为确保能够传代，需采取特殊措施，如使用适宜底物（如鼠尾胶原）及选用不同的细胞生长因子（如胰岛素、氢化可的松、雌激素等），并可考虑动物媒介培养。

1. 在离心管中加入4ml肝素抗凝血液，再加入2ml RPMI 1640。

2. 混匀后缓慢沿管壁加至预置有4ml淋巴细胞分离液的液面，静置30分钟。

3. 以1500转/分离心15分钟，吸取白细胞层（第二层）至另一离心管中。

4. 加RPMI 1640洗涤白细胞两次，每次使用5ml。

5. 将白细胞接种至1ml RPMI 1640培养基中，加入10μl环胞霉素和100μl EBV液体，轻轻混匀。

6. 将混合液放置于水浴摇床中，设置为40次/分，37℃，持续3小时。

7. 以1500转/分离心15分钟后，将细胞接种至1ml培养基中（含1mM/ml谷氨酰胺），加入10μl环胞霉素，轻轻混匀，37℃培养。

8. 5天后观察细胞的转化与生长情况，判定是否进行半量换液，通常1-2次，并保持环胞霉素的浓度。

9. 当转化细胞数量明显上升并出现细胞团块时，即可转入25ml细胞培养瓶中，添加1-2ml培养基，37℃培养10-15天，一般每3-4天观察一次，决定换液及传代。

10. 随着细胞数量达到一定程度，进行冻存前的核型分析和存档，以确保品质与完整性。通过这种方式，南宫28NG相信品牌力量，始终坚持高标准的细胞培养与研究。